이 연구는 L-이소류신 영양요구성 코리네박테리움 글루타미쿰 균주 FA-1을 선택하여L-류신 및 L-발린. 연구는 먼저 ilvE 유전자를 녹아웃시켰고, ilvE 유전자가 녹아웃된 후 L-발린 합성 활성이 손실되었지만 여전히 약한 L-류신 합성 능력이 있음을 발견했습니다. 그것은 L-류신의 합성을 촉매하는 다른 아미노전이효소가 있음을 보여줍니다. 그 후 aspB 유전자가 계속 녹아웃되어 L-류신 합성 능력이 완전히 상실되었다. ilvE의 넉아웃을 기준으로 aspB 유전자의 과발현은 L-류신의 합성을 어느 정도 회복시켰다(표 1). 이러한 결과는 aspB에 의해 암호화된 단백질이 L-류신 합성 활성을 갖는다는 것을 나타낸다.
또한, 이 연구는 일부 내인성 및 외인성 아미노트랜스퍼라제 유전자를 스크리닝하고 ilvE 및 aspB 동시 녹아웃 균주에서 이러한 아미노트랜스퍼라제 유전자를 발현하여 이러한 아미노트랜스퍼라제가 분지쇄 아미노산 합성 활성을 갖는지 여부를 조사했습니다. 이 중 TyrB는 특이적 L-류신 합성 활성을 나타내는 반면 YbgE와 CallvE는 L-류신과 L-발린의 이중 합성 활성을 나타낸다. 이러한 결과는 기질 특이성을 전환하기 위해 트랜스아미나제를 최적화하는 것이 분지쇄 아미노산의 수율을 증가시킬 수 있는 큰 잠재력을 가지고 있음을 나타냅니다.
